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HEPES即4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-1-ethanesulfonic acid,中文名为4-羟乙基哌嗪乙磺酸(游离酸)、4-(2-羟乙基)哌嗪-1-乙磺酸(游离酸)或N-(2-羟乙基)哌嗪-N′-(2-乙磺酸)(游离酸),分子式为C8H18N2O4S,分子量为238.30,CAS Number 7365-45-9。HEPES是一种常用的两性离子缓冲试剂,有效缓冲范围为pH6.8-8.2,pKa(25℃)=7.5。
HEPES溶液(1M,pH7.4)常用于细胞培养,一般工作浓度为10-25mM。相比于低pKa的碳酸氢盐缓冲液,HEPES的pKa为7.5,在pH7.2-7.6范围内具有良好的缓冲能力,适合需要精确pH条件的细胞培养,同时在开放式培养或细胞长时间离开CO2培养箱时(如细胞观察),HEPES也能提供良好的缓冲能力。HEPES是很多细胞培养体系缓冲液的优选,因为HEPES对细胞膜无通透性,对各种生化反应影响很小,化学和酶学稳定,并且具有非常低的可见光和UV光吸收。HEPES在浓度为10-25mM时对细胞无毒性,但当浓度超过40mM后可能对某些细胞产生毒性,影响细胞生长。本HEPES溶液(1M,pH7.4)配制在细胞培养级去离子水中,经过过滤除菌,可以直接用于细胞培养等用途,使用前不必再进行过滤等除菌处理。
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